多寶魚好吃，養(yǎng)殖過程中卻容易因腹水病和弧菌病引發(fā)大規(guī)模發(fā)病和死亡。近日，針對弧菌病研發(fā)的大菱鲆(俗稱多寶魚)鰻弧菌基因工程活疫苗(MVAV6203株)正式獲批國家一類新獸藥證書。該疫苗與2017年誕生的針對腹水病的大菱鲆遲鈍愛德華氏菌活疫苗聯(lián)用后，多寶魚的養(yǎng)殖死亡率有望被控制在10%以內(nèi)，并有效降低養(yǎng)殖用抗生素的使用。

　　這一成果是華東理工大學(xué)生物工程學(xué)院張?jiān)�興教授團(tuán)隊(duì)歷時(shí)18年探索取得的。該團(tuán)隊(duì)為我國現(xiàn)代水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的綠色發(fā)展提供核心技術(shù)與產(chǎn)品支撐，也為我國水產(chǎn)疫苗的產(chǎn)業(yè)化開發(fā)提供了技術(shù)體系與標(biāo)準(zhǔn)模式。

　　我國是水產(chǎn)養(yǎng)殖大國，但近年來病害問題日漸突出，水產(chǎn)動物病害種類達(dá)200余種，每年養(yǎng)殖病害發(fā)病率達(dá)50%，平均死亡率達(dá)30%。養(yǎng)殖戶慣用抗生素應(yīng)對海水魚類病害，但以化學(xué)藥物為主的病害防控方案已深層次影響到水環(huán)境安全、水產(chǎn)食品安全以及人類健康，成為產(chǎn)業(yè)綠色發(fā)展的重要瓶頸之一。

　　華東理工大學(xué)生物生物工程學(xué)院張?jiān)�興教授團(tuán)隊(duì)從2001年開始從事水產(chǎn)病原致病機(jī)制研究及疫苗創(chuàng)制工作，在國內(nèi)最早建立基因工程減毒活疫苗的設(shè)計(jì)與開發(fā)平臺，以期建立以疫苗接種為核心的病害免疫防控策略，推動水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)向綠色可持續(xù)發(fā)展模式轉(zhuǎn)變。在國家“863”計(jì)劃等科技項(xiàng)目的資助下，“海洋鰻弧菌減毒活菌疫苗的研制”項(xiàng)目率先開展。

　　弧菌病主要病原體為鰻弧菌(Vibrio anguillarum)，張?jiān)�興團(tuán)隊(duì)在建立和闡明相關(guān)毒力基因組生物信息學(xué)的基礎(chǔ)上，利用敲除相關(guān)毒力基因片段的基因工程手段構(gòu)建環(huán)境安全、經(jīng)濟(jì)、高效價(jià)的新型減毒活菌疫苗株。與傳統(tǒng)的滅活疫苗、亞單位疫苗相比，基因缺失減毒活疫苗能夠有效激發(fā)細(xì)胞和體液免疫，并能通過簡單的浸泡操作完成規(guī)模化免疫接種，因而具有突出的應(yīng)用優(yōu)勢。

　　減毒活疫苗的開發(fā)需要精確調(diào)控免疫保護(hù)力與生物安全性之間的平衡，減毒靶點(diǎn)的選擇和組合設(shè)計(jì)是產(chǎn)品創(chuàng)制的核心。基因缺失減毒活疫苗構(gòu)建開發(fā)策略中的基因缺失是其技術(shù)關(guān)鍵所在。團(tuán)隊(duì)核心成員劉琴教授、王啟要教授等在對鰻弧菌、愛德華氏菌等毒力基因研究的基礎(chǔ)上，參考國際上的相關(guān)經(jīng)驗(yàn)，確立了減毒活疫苗構(gòu)建策略：一是選取影響病原菌在宿主體內(nèi)定殖能力的芳香化合物代謝途徑合成基因作為基本缺失靶基因，實(shí)現(xiàn)病原菌無法在侵染魚體內(nèi)增殖存活的目的;二是篩選適宜的毒力因子合成基因作為缺失靶點(diǎn)，使其毒力合成能力喪失;三是建立并完善適用于病原菌的無標(biāo)記缺失技術(shù)平臺，采用該技術(shù)平臺，實(shí)施靶基因的框內(nèi)定向缺失，構(gòu)建獲得目標(biāo)病原株的靶基因單缺或雙缺的無標(biāo)記突變株作為減毒疫苗株候選株。

　　歷經(jīng)18年努力，該團(tuán)隊(duì)終于在國際上率先構(gòu)建成功不攜帶任何外源基因片段的鰻弧菌減毒活菌疫苗株。在田間預(yù)試驗(yàn)中，1萬尾規(guī)模的大菱鲆幼魚在簡單浸泡免疫給藥(1-3 min)后，即可實(shí)現(xiàn)弧菌病3個月80%以上的有效免疫保護(hù)力。免疫后經(jīng)國家水產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心產(chǎn)品質(zhì)量檢測，魚體內(nèi)殘留毒性安全指標(biāo)優(yōu)于國家標(biāo)準(zhǔn)。不僅是大菱鲆，對石斑魚、大黃魚、牙鲆等海水魚均具有免疫保護(hù)力。

　　2010年，大菱鲆鰻弧菌基因工程活疫苗研發(fā)成果轉(zhuǎn)化給上海浩思海洋生物科技有限公司，在校企協(xié)作下完成新藥注冊，2019年4月正式獲批國家一類新獸藥證書。這是國際上首例被行政許可的海水魚類弧菌病基因工程活疫苗，代表著我國水產(chǎn)疫苗研發(fā)的綜合技術(shù)水平已經(jīng)躋身國際前列。團(tuán)隊(duì)主要成員馬悅博士、劉曉紅博士、吳海珍教授和肖婧凡副教授等在病原診斷、疫苗評價(jià)、臨床試驗(yàn)、生產(chǎn)應(yīng)用等各個環(huán)節(jié)作出了積極貢獻(xiàn)。

　　“海水魚發(fā)病，受病原、季節(jié)、地域差異等多種因素的影響，兩苗聯(lián)用可以更加有效對病害進(jìn)行防治。”劉琴教授說，中國的海水魚疫苗屈指可數(shù)，而國際上，挪威對三文魚疫苗的研發(fā)已經(jīng)發(fā)展到7聯(lián)苗，日本也實(shí)現(xiàn)了3聯(lián)苗的突破。目前，該團(tuán)隊(duì)已在布局愛德華氏菌活疫苗和鰻弧菌基因工程活疫苗的聯(lián)合應(yīng)用，為推動國產(chǎn)海水養(yǎng)殖動物多聯(lián)活疫苗的誕生，加快推進(jìn)中國水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)綠色發(fā)展而努力。(記者 姜泓冰)